Toxicology of synthetic antioxidants EQ, BHA, BHT and their metabolites retained in the fillet of farmed Atlantic salmon

Populærvitenskapelig sammendrag fra prosjektets faglige rapportering
Hva er antioksidanter?
Antioksidanter brukes som konserveringsmidler i både fôr og mat. I maten beskytter antioksidanter mot uønsket harskning og i kroppen beskytter de mot skader på cellene som følge av oksidering. Det finnes mange forskjellige typer, både naturlige og syntetiske. Vitamin E og vitamin C er kjente naturlige antioksidanter. Syntetiske antioksidanter klassifiseres som tilsettingsstoffer.

I EU og Norge er det fem syntetiske antioksidanter (butylhydroxyanisol (BHA), butyl-hydroxy-toluen (BHT), ethoxyquin (EQ), propyl-gallat (PG) og oktyl-gallat (OG) som er tillatt å bruke i fiskefôr. Disse antioksidantene beskytter fettet i fôret mot harskning. EQ står i en særstilling sammenliknet med de fire andre antioksidantene. Denne er nemlig påbudt å tilsette i fiskemel ved transport med båt fordi den også hindrer varmeutvikling og eksplosjon.

Er antioksidanter giftige?
I prinsippet kan alle stoffer være giftige, og det er i hovedsak dosen som avgjør om et stoff er giftig eller ikke. Mengden av syntetiske antioksidanter man får i seg fra et fiskemåltid er relativt liten, og man må derfor ha sensitive analytiske metoder for å påvise om stoffene er tilstede i mat. Raffinering av analytiske metoder for EQ, BHT og BHA har vært en viktig del av dette prosjektet.

For å beskytte dyre- og folkehelsen anvender man grenseverdier som sier hvor mye av de ulike stoffene det er tillatt å ha i fôr og mat. Grenseverdien i fiskefôr er på 150 mg/kg og gjelder for den samlede mengden av BHA, BHT og EQ. Fôringsforsøk med fisk har vist at disse antioksidantene i noen grad overføres fra fôr til filet.

For å være sikker på at inntak av tilsetningsstoffer ikke skal gi noen helserisiko for mennesker etablerer helsemyndighetene grenser for akseptabelt daglig inntak (ADI) av tilsettingsstoffer som brukes i mat. ADI er den mengden av et stoff en person kan få i seg daglig gjennom hele livet uten at det er helseskadelig.

 

Dette prosjektet viser at hvis man tar utgangspunkt i den høyeste konsentrasjonen av BHT, EQ og BHA som man kan finne i oppdrettsarter som torsk, kveite, ørret og laks, og beregner ADI verdien fra en 300 g porsjon, så vil man få maksimalt 15 % av ADI for EQ, < 1 % for BHA og opp til 74 % for BHT. Antioksidantene kan imidlertid forandre kjemisk form i kroppen. I laks omdannes EQ hovedsakelig til en forbindelse som kalles ethoxyquin dimer (EQDM). Hvis man summerer EQ og EQDM vil konsentrasjonen kunne overstige grenseverdien for EQ.

I dette prosjektet har det blitt funnet flere omdanningsprodukter av EQ, BHT og BHA og giftigheten av disse har blitt testet i en rekke forsøk. I et forsøk ble giftigheten av EQDM undersøkt. Hos rotter som fikk fôr som var tilsatt 2500 ganger mer syntetisk EQDM enn det akseptable daglige inntaket på 0,005 milligram per kilo kroppsvekt som gjelder for EQ, observerte man ingen negativ effekt på veksten eller tegn på mistrivsel. Dette betyr at rotter tåler relativt høye doser av EQDM.

I et annet forsøk ble giftigheten av BHT og omdanningsprodukter av BHT undersøkt. Rotter som fikk høye nivåer av BHT og omdanningsprodukter av BHT i laks indikerte at rotter effektivt skiller ut BHT og at de ikke fikk negative helseeffekter. For å redusere antallet dyr som benyttes i dyreforsøk er det viktig å finne alternativer forsøksmodeller. I dette prosjektet har det blitt gjennomført en rekke celleforsøk som har undersøkt effekten av syntetiske antioksidanter på celleoverlevelse og på uttrykk av gener som er involvert i cellens håndtering av slike stoffer. Siden stoffer som regel opptrer i blanding i mat har det vært fokusert på studier av samspillseffekter mellom de syntetiske antioksidantene. Disse forsøkene har vært utført på leverceller fra sebrafisk, laks og mennesker og viser at de ulike antioksidantene både kan redusere og forsterke hverandre sin effekt.

EUs mattrygghetsorgan, EFSA, jobber for tiden med en re-evaluering av tilsetningsstoffer i fôr, inkludert syntetiske antioksidanter. Kunnskap om ulike tilsetningsstoffers giftighet og effekt på helse utgjør et viktig grunnlag for slike evalueringer og resultatene fra dette prosjektet vil kunne bidra til dette arbeidet.

Prosjektet er sluttrapportert og godkjent i Norges forskningsråd/Matprogrammet.