Heart and Skeletal Muscle Inflammation (HSMI) in Atlantic Salmon: Diagnosis, Pathogenesis and Epidemiology

I begynnelsen av prosjektperioden ble det gjennomført et smitteforsøk med tanke på å undersøke smitteegenskapene ved HSMB. Analyser av materiale fremkommet ved dette forsøk avslørte at sykdomsprosessen begynner med infiltrasjon av betennelsesceller langs kar i det kompakte hjertemuskellaget samt i epi- og endokardiet, med etterfølgende betennelse også i myokard. Det viste også at smittestoffet er til stede i både hjerte, nyre, milt, lever og blodplasma under den kliniske fasen av sykdommen. Resultatene fra dette smitteforsøket er blitt presentert i en vitenskapelig artikkel (Kongstorp og Taksdal 2009 http://www.vetinst.no/Publikasjoner/Vitenskapelige-artikler/Vitenskapelige-artikler-2009/Studies-with-experimental-transmission-of-heart-and-skeletal-muscle-inflammation-in-Atlantic-salmon-Salmo-salar-L/(language)/nor-NO ), samt presentert på ulike konferanser, både nasjonalt og internasjonalt. Derved ble delmålet om undersøkelsen av patogenesen ved HSMB-infeksjon nådd.

 

Produksjonsdata fra 2003–2007 samt informasjon om påvisning av sykdommer i lakseoppdrett ble innsamlet for å se på mulige smitteveier ved hjelp av matematiske modeller. Det ble da i samarbeid med Norsk Regnesentral utviklet en smittespredningsmodell, og resultater fra modellering viser at spredningen av HSMB på noen områder ligner på andre virussykdommer, men at det også finnes vesentlige forskjeller. De viktigste risikofaktorene for HSMB-utbrudd var om det hadde vært HSMB på lokaliteten året før, samt om lokaliteten hadde samme eier som en annen HSMB-affisert lokalitet. Et annet resultat av denne modelleringen er at risikoen for å få HSMB-utbrudd er dobbelt så høy for høstutsatt som for vårutsatt smolt. Denne spredningsmodellen samt resultatene har blitt publisert i et vitenskapelig tidsskrift (Aldrin et al, 2010 http://www.vetinst.no/Publikasjoner/Vitenskapelige-artikler/Vitenskapelige-artikler-2010/A-stochastic-model-for-the-assessment-of-the-transmission-pathways-of-heart-and-skeleton-muscle-inflammation-pancreas-disease-and-infectious-salmon-anaemia-in-marine-fish-farms-in-Norway/(language)/nor-NO ), og således er delmålet om å utvikle en slik spredningsmodell nådd.

 

Når det gjelder utvikling av diagnostiske verktøy for påvisning av HSMB, har det vært et betydelig gjennombrudd i forskningen, idet det har lykkes å identifisere et virus fra HSMB-infisert fisk. I samarbeid med prosjektet “Modern tools for the study of host-agent interactions of emerging fish diseases” (Forskningsrådets prosjektnr. 186907), ikke delfinansiert av FHF på Veterinærinstituttet, er det blitt brukt en ny metode, der store mengder genmateriale i vevsprøver sekvenseres og bearbeides ved hjelp av bioinformatikk. I denne prosessen kan mulige viruskandidater fremkomme. En av disse kandidatene var et nytt virus som viste seg å være kausal faktor for utvikling av HSMB http://www.vetinst.no/Nyheter/Nytt-laksevirus-identifisert/(language)/nor-NO. Dette er publisert i et vitenskapelig tidsskrift (Palacios et al, 2010 http://www.vetinst.no/Publikasjoner/Vitenskapelige-artikler/Vitenskapelige-artikler-2010/Heart-and-Skeletal-Muscle-Inflammation-of-Farmed-Salmon-Is-Associated-with-Infection-with-a-Novel-Reovirus/(language)/nor-NO ), og viruset er navngitt Piscine Reovirus (PRV). Institusjonene bak påvisningen (Veterinærinstituttet og University of Comobia i New York) har tatt ut patent på å bruke virussekvensen til vaksineutvikling. Det er også blitt screenet villfisk fra en stor del av de norske vassdrag, og det har vist sig, at dette viruset finnes utbredt i miljøet. Dessuten er PRV funnet i prøver fra Chile og Irland. Det er blitt utviklet en PCR-metode for påvisning av PRV, som tilbys kommersielt av Veterinærinstituttet. De er også, i samarbeid med Norges Veterinærhøyskole blitt utviklet et antistoff samt prober til in-situ hybridisering som etter validering vil kunne brukes til påvisning av virus. Det ser nå ut som PRV finnes i nesten alle oppdrettsanlegg i Norge, uansett om de har HSMB-utbrudd eller ikke. Det synes å være en sammenheng mellom mengden virus og graden av patologiske forandringer hos syk fisk. Det gjenstår å finne ut mer om denne sammenhengen og hvordan dette kan brukes i diagnostikken. Fremtidige forskningsprosjekter må avklare nærmere sammenhengen mellom PRV og HSMB-utbrudd (se blant annet http://www.vetinst.no/Publikasjoner/Vitenskapelige-artikler/Vitenskapelige-artikler-2012/Immunohistochemical-detection-of-piscine-reovirus-PRV-in-hearts-of-Atlantic-salmon-coincide-with-the-course-of-heart-and-skeletal-muscle-inflammation-HSMI/(language)/nor-NO ).

 

Det er jobbet mye med dyrkning av HSMB-virus i cellekultur på Veterinærinstituttet. I tillegg til et panel av fiskecellelinjer tilgjengelige i laboratoriet fra før, er det også hentet inn nye cellekulturer. Dyrkning er forsøkt både fra helt fersk materiale fra HSMB-syk fisk og fra materiale fra smitteforsøket. Vi har kunnet påvise PRV i opp til 5 passasjer før virus forsvinner fra cellekulturene. Resultatene tyder på at viruset enten er veldig labilt, eller at betingelsene for virusopptak, replikasjon og sammensetting ikke er optimale i de ulike celletyper som nå er benyttet. Videre forsøk på dyrkning av HSMB-virus vil bli gjennomført i tilknytning til andre prosjekter.

 

Resultatene fra dette prosjektet er bredt presentert, blant annet under Havbrukskonferansen 2010 og 2012, Frisk Fisk-konferansen 2009 og 2011, Lofotseminaret 2010, PD TriNation møte 2010 og AVF og Fiskehelseforeningens høstkurs 2010.

 

Mer om HSMB: http://www.vetinst.no/Temasider/Fiskesykdommer/Hjerte-og-skjelettmuskebetennelse-HSMB/(language)/nor-NO