Prosjektnummer
Program rensefisk: Parasittisk infeksjon hos rognkjeks: Nucleospora cyclopteri
• Vertikal smitte er sannsynligvis ikke en dominerende smittevei for N. cyclopteri, men kan ikke utelukkes.
• Resultatene tyder ikke på at skottelus, Caligus elongatus, er vert for N. cyclopteri.
• Enkelte rognkjeks kan ha store mengder parasitter i hematopoietisk vev uten tydelig patologi.
• Dagens metoder brukt i rutinediagnostikk er ikke sensitive nok til effektiv påvisning av infeksjoner med N. cyclopteri.
• In situ hybridiseringsmetodikk, og da spesielt ved bruk av fluorescerende LNA-modifiserte oligonukleotidprober, er et effektivt verktøy til bruk i diagnostikken og i studier av vevstropisme.
• Svaber- og blodprøver og gjellebiopsier er mulige å benytte som ikke-letale påvisningsmetoder for N. cyclopteri.
Parasitten Nucleospora cyclopteri (Microsporidia) er en av mange parasittiske agens som infiserer rognkjeks, Cyclopterus lumpus. Den har flere ganger forårsaket sykdom og dødelighet hos rognkjeks i oppdrett, men er også alminnelig forekommende i frisk fisk. Betydningen av infeksjoner med denne parasitten er derfor uklar, og den forekommer ofte også sammen med flere andre agens. Sykdom hos rognkjeks, kan resultere i nedsatt helse og appetitt og påvirke rognkjeksens evne som lusespiser. Det er derfor viktig med kunnskap om de forskjellige agens som infiserer rognkjeks for å kunne si noe om betydningen for fiskens helse.
Dette prosjektet hadde som hovedmål å identifisere hvordan man kunne sikre en populasjon av rognkjeks i landanlegg som var fri for smitte med N. cyclopteri og å finne ut hvilken betydning parasitten har for helsen til rognkjeksen og dermed på fiskens effekt som lusespiser. Prosjektet hadde derfor som mål å kartlegge N. cyclopteri og andre agens i stamfisk, rogn/melke, yngel og rognkjeks i merd, skulle studere mulige smitteveier for parasitten, og skulle kartlegge den kliniske betydningen av parasitten.
Det lykkes ikke å eksperimentelt indusere vertikal smitte og dermed følge en gruppe rognkjeks smittet med N. cyclopteri fra yngel eller etter sjøsetting. Det var dermed ikke mulig å studere patogenese, smittedynamikk, eller om Nucleospora-infeksjon pre-disponerer for andre infeksjoner. Ko-infeksjoner, optimal prøvetaking og vevstropisme hos villfanget rognkjeks ble undersøkt. N. cyclopteri forekom i 60 % av voksen vill rognkjeks fra områdene rundt Averøy, Nordmøre. Disse fiskene ble analysert for en rekke agens (virus, bakterier og parasitter) som er alminnelige i andre fiskearter eller påvist i rognkjeks i oppdrett, men ingen viktige patogener ble påvist. Noen antatt lite patogene mikroparasitter var derimot vanlige, deriblant Kudoa islandica (Myxozoa) i muskulatur og koksidier i tarmen.
Nucleospora cyclopteri ble påvist i alle undersøkte vev: for-, midt- og baknyre, milt, hjerte, gjeller, hjerne, muskel, lever og blod, noe som tilsier at infeksjonen er systemisk. Mengden av N. cyclopteri var høyest i hodenyre, fulgt av midt- og baknyre, milt, hjerte og gjeller. Parasitten viste høyest prevalens i hjertets ventrikkel. Det ble gjort observasjoner som tyder på at parasitten frigjøres fra infiserte fisk gjennom urin og galle.
Resultatene viser at parasitten kan påvises ved svabring av hud, gjellebiopser og blodprøver, noe som kan gi mulighet for å påvise parasitten uten å ta livet av fisken. Et problem kan være kontaminering, hvis en har holdt fisk i kar sammen med parasittfrigjørende vertsindivider (sheddere).
Gjennom prosjektet ble det laget en bildedatabase for normalhistologi og patologiske agens som vil være åpent tilgjengelig. En slik bildedatabase vil være viktig for diagnostikere og forskere når de skal vurdere patologiske funn hos rognkjeks.
Resultatene fra dette prosjektet tilsier ikke at vertikal smitte er en dominerende smittevei, men det kan ikke utelukkes. Uansett bør det være naturlig å følge “føre var-prinsippet” og unngå bruk av positive individer til stamfisk.
I og med at N. cyclopteri utvilsomt ødelegger leukocytter i til dels høyt antall og i store områder, mener prosjektgruppen det er naturlig å tro at parasitten har en påvirkning på fiskens immunkompetanse.
-
Norwegian Veterinary Institute, Norwegian University of Life Sciences, University of Bergen, and Institute of Marine Research. Poster. November 2019. By Haakon Hansen (Norwegian Veterinary Institute), Turhan Markussen (Norwegian University of Life Sciences), Simon Weli (Norwegian Veterinary Institute), Egil Karlsbakk (University of Bergen and Institute of Marine Research), Randi Faller (Norwegian Veterinary Institute), and Even Thoen (Norwegian Veterinary Institute).
-
Poster: Histology and anatomy of clinically healthy Atlantic lumpfish, Cyclopterus lumpus L.
University of Tromsø – The Arctic University of Norway, Norwegian Veterinary Institute, and University of Bergen. Poster. November 2019. By Oda Klingenberg (University of Tromsø), Haakon Hansen (Norwegian Veterinary Institute), Egil Karlsbakk (University of Bergen), Tore Seternes (University of Tromsø), and Even Thoen (Norwegian Veterinary Institute).
-
Poster: Normalhistologi hos rognkjeks (Cyclopterus lumpus) fra klekking til utsett i sjø
Universitetet i Tromsø – Norges arktiske universitet/Norges fiskerihøgskole (NFH), Veterinærinstituttet og Universitetet i Bergen/Institutt for biovitenskap (BIO). Poster. November 2019. Av Oda Klingenberg (Universitetet i Tromsø/Norges fiskerihøgskole (NFH)), Haakon Hansen (Veterinærinstituttet), Egil Karlsbakk (Universitetet i Bergen/Institutt for biovitenskap (BIO)), Tore Seternes (Universitetet i Tromsø/Norges fiskerihøgskole (NFH)) og Even Thoen (Veterinærinstituttet).
-
Veterinærinstituttet i Oslo, Norges miljø- og biovitenskaplige universitet (NMBU), Universitetet i Bergen og Havforskningsinstituttet. Poster. November 2019. Av Haakon Hansen (Veterinærinstituttet i Oslo), Turhan Markussen (Norges miljø- og biovitenskaplige universitet (NMBU)), Simon Weli (Veterinærinstituttet i Oslo), Egil Karlsbakk (Universitetet i Bergen og Havforskningsinstituttet), Randi Faller (Veterinærinstituttet i Oslo) og Even Thoen (Veterinærinstituttet i Oslo).
-
Universitetet i Tromsø (UIT), Fakultet for biovitenskap, fiskeri og økonomi, Norges fiskerihøgskole. Masteroppgave i fiskehelse. Mai 2019. Av Oda Klingenberg.
-
University of Bergen, Department of Biological Science, Faculty of Mathematics and Natural Sciences. Master thesis in fish Health. 2018. By Kathrine Nilsen
-
University of Bergen, Department of Biological Sciences. Thesis for the degree Master of Science in Aquamedicine. June 2017. By Benedicte Rebecca Endresen Warland.
-
Veterinærinstittutet. Rapport 29-2019. Av Haakon Hansen, Even Thoen, Marta Alarcón, Magnus Devold, Oda Klingenberg, Kathrine Nilsen, Benedicte Warland, Turhan Markussen, Randi Faller, Saima N. Mohammad, Tore Seternes, Simon Weli og Egil Karlsbakk.
Hittil har det vært brukt villfanget stamfisk av rognkjeks, men det er nå anbefalt å benytte oppdrettet stamfisk i fremtiden. Det er startet avlsarbeid på rognkjeks og det er et mål om å være uavhengig av villfanget stamfisk. Mikrosporidien Nucleospora cyclopteri var assosiert med kronisk dødelighet blant yngel av oppdrettet rognkjeks på atlanterhavskysten av Canada (Mullins et al. 1994) og med patologiske forandringer i oppdrett i Norge (Alarcon et al., 2015). Parasitten har vist seg å være en vanlig forekommende parasitt i prøver fra vill stamfisk og er også påvist i egg og rognvæske og har et betydelig potensiale til å bli et problem i rognkjeksoppdrett i Norge. Uansett infeksjonsbakgrunn, så vil rognkjeks i åpne merder kunne bli infisert av parasitter fra miljøet rundt og kunne utvikle sykdom. Det er derfor et stort behov for økt kunnskap om hvilken betydning N. cyclopteri har for rognkjeks.
• Å kartlegge forekomst av N. cyclopteri i stamfisk, yngel og rognkjeks i merd.
• Å finne smitteveier for parasitten.
• Å finne hvilken betydning N. cyclopteri har for effekten av rognkjeks som lusebeiter.
Delmål
• Å etablere en smittemodell for N. cyclopteri og rognkjeks.
• Å etablere bedret prøveuttak i felt (biopsi og blodprøver).
• Å gi ny og viktig kunnskap om normal anatomi/histologi for uinfisert rognkjeks (bildemanual).
• Å bedre diagnostikken for påvisning av N. cyclopteri (utprøving av fargemetodikk).
Etablering av en smittemodell for N. cyclopteri er viktig for å kunne studere effekter av infeksjoner, immunologi og for utvikling og test av eventuelle behandlinger og vaksiner. Prosjektet søker også å avklare om parasitten har mellomverter eller om den smitter direkte og om den kan smitte vertikalt. Det siste er ikke minst viktig for å kunne utvikle desinfeksjonsprosedyrer for rogn.
AP 1: Feltarbeid og histologiske analyser
Her skal man følge infeksjoner med N. cyclopteri i rognkjeks gjennom hele produksjonssyklusen fra stamfisk, via rogn og yngel, og rognkjeksen har stått i sjø gjennom en produksjonssyklus for laks for å beskrive påvirkningen denne parasitten har på rognkjeks i oppdrett. I arbeidspakken vil det gjennomføres feltarbeid med uttak av prøver som følges opp av molekylære analyser (real time (sanntids) polymerasekjedereaksjon (RT PCR)) og histologiske analyser i laboratoriet. Det vil utvikles og etableres nye metoder for prøvetaking i felt (biopsi og blodprøver).
AP 2: Smitteforsøkene
Denme arbeidspakken består av smitteforsøk og er todelt; én del med pilotforsøk for å etablere en smittemodell for N. cyclopteri i rognkjeks og én del som følger opp resultatene fra pilotforsøket i et utvidet smitteforsøk.
Prosjektgruppen består av parasittologer og patologer fra Veterinærinstituttet og Universitetet i Bergen med lang erfaring fra diagnostikk, taksonomi, smitteforsøk og feltarbeid på parasitter.
Veterinærinstituttet vil ha ansvar for AP 1, mens Universitetet i Bergen vil ha ansvaret for AP 2.
I tillegg deltar Patogen Analyse AS med kompetanse på molekylær diagnostikk og analyse av materiale for påvisning av N. cyclopteri.
• 2 artikler i vitenskapelige tidsskrifter
• 2–3 M. Sc.-oppgaver (UiT og UiB)
• presentasjon på Havbruk 2018- og Rensefiskkonferansene
• presentasjon på andre relevante møter
-
Veterinærinstittutet. Rapport 29-2019. Av Haakon Hansen, Even Thoen, Marta Alarcón, Magnus Devold, Oda Klingenberg, Kathrine Nilsen, Benedicte Warland, Turhan Markussen, Randi Faller, Saima N. Mohammad, Tore Seternes, Simon Weli og Egil Karlsbakk.